Tanken om et Jernbanemuseum i Odense blev fremsat af daværende generaldirektør P.E.N. Skov. Valget faldt på Odense der foruden sin centrale placering også havde gode faciliteter i en lokomotivremise ved Odense Banegård. Museet er blevet en stor attraktion med et stigende besøgstal ikke mindst på grund af de meget varierende udstillinger. DSB Jernbanemuseum Odense åbnede den 17. April 1975.

Jernbanemuseets emner er Danmarks jernbane- og færgehistorie fra 1844 til vore dage. Der er udstilling på ca. 5000 m2  med kongelige salonvogne, jernbanevogne og lokomotiver - både damp og diesel. Der er foruden Wagons-Lits spisevogn, perronmiljø fra ca. 1890, førerrumssimulator, færgeudstilling med plancher, og mange modeller.

DSB museumstog står for kørsel med museets tog, bl.a. kørsel til Fruens Bøge og Nyborg Banegård.